RESUMO E EXPLICACIÓN DA PROBA
A malaria é unha enfermidade febril, hemolítica e transmitida por mosquitos que infecta a máis de 200 millóns de persoas e mata a máis de 1 millón de persoas ao ano.Está causada por catro especies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale e P. malariae.Todos estes plasmodios infectan e destrúen os eritrocitos humanos, producindo escalofríos, febre, anemia e esplenomegalia.P. falciparum causa enfermidades máis graves que as outras especies plasmodiais e é responsable da maioría das mortes por malaria.P. falciparum e P. vivax son os patóxenos máis comúns, porén, hai unha considerable variación xeográfica na distribución das especies.
Tradicionalmente, a malaria é diagnosticada pola demostración dos organismos en frotis espesos de sangue periférico tinguidos de Giemsa, e as diferentes especies de plasmodio distínguense pola súa aparición en eritrocitos infectados.A técnica é capaz de realizar un diagnóstico preciso e fiable, pero só cando a realizan microscopistas expertos utilizando protocolos definidos, o que presenta grandes obstáculos para as zonas remotas e pobres do mundo.
A proba rápida Malaria Pf/Pv Ag está desenvolvida para resolver estes obstáculos.Utiliza anticorpos específicos da proteína II rica en histidina de P. falciparum (pHRP-II) e da lactato deshidroxenase de P. vivax (Pv-LDH) para detectar e diferenciar simultaneamente a infección por P. falciparum e P. vivax.A proba pode ser realizada por persoal sen formación ou mínimamente cualificado, sen equipamento de laboratorio
PRINCIPIO
A proba rápida de malaria Pf/Pv Ag é un inmunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.Os compoñentes da proba de tiras consisten en: 1) unha almofada conxugada de cor borgoña que contén anticorpo anti-Pv-LDH de rato conxugado con ouro coloide (conxugados Pv-LDH-oro) e anticorpo anti-pHRP-II de rato conxugado con ouro coloide (conxugados pHRP-II- ouro), 2) unha banda de proba de membrana de Pv-LDH e dúas bandas de control (pHRP-II-conxugados de ouro). banda).A banda Pv está recuberta previamente con outro anticorpo específico anti-Pv-LDH de rato para a detección da infección por Pv, a banda Pf está recuberta previamente con anticorpos policlonais anti-pHRP-II para a detección da infección por Pf e a banda C está recuberta con IgG anti-rato de cabra.
Durante o ensaio, un volume adecuado da mostra de sangue é dispensado no pozo da mostra (S) do casete de proba, engádese un tampón de lise ao pozo do tampón (B).O tampón contén un deterxente que lisa os glóbulos vermellos e libera varios antíxenos, que migran por acción capilar a través da tira mantida no casete.Pv-LDH se está presente no exemplar unirase aos conxugados Pv-LDH-ouro.Despois, o inmunocomplexo é capturado na membrana polo anticorpo anti-Pv-LDH pre-revestido, formando unha banda de Pv de cor borgoña, o que indica un resultado positivo da proba de Pv.Alternativamente, o pHRP-II se está presente na mostra unirase aos conxugados pHRP-II-ouro.Despois, o inmunocomplexo é capturado na membrana polos anticorpos anti-pHRP-II revestidos previamente, formando unha banda de Pf de cor borgoña, o que indica un resultado positivo da proba de Pf.A ausencia de bandas de proba suxire un resultado negativo.A proba contén un control interno (banda C) que debería mostrar unha banda de cor borgoña do inmunocomplexo de conxugados IgG anti-rato de cabra/IgG de rato (anti-Pv-LDH e anti-pHRPII)-ouro independentemente do desenvolvemento da cor en calquera das bandas de proba.En caso contrario, o resultado da proba non é válido e a mostra debe ser probada de novo con outro dispositivo.
