RESUMO E EXPLICACIÓN DA PROBA
A malaria é unha enfermidade febril, hemolítica e transmitida por mosquitos que infecta a máis de 200 millóns de persoas e mata a máis de 1 millón de persoas ao ano.Está causada por catro especies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale e P. malariae.Todos estes plasmodios infectan e destrúen os eritrocitos humanos, producindo escalofríos, febre, anemia e esplenomegalia.P. falciparum causa enfermidades máis graves que as outras especies plasmodiais e é responsable da maioría das mortes por malaria, e é un dos dous patóxenos da malaria máis comúns.
Tradicionalmente, a malaria é diagnosticada pola demostración dos organismos en frotis espesos de sangue periférico tinguidos de Giemsa, e as diferentes especies de plasmodio distínguense pola súa aparición en eritrocitos infectados.A técnica é capaz de realizar un diagnóstico preciso e fiable, pero só cando a realizan microscopistas expertos utilizando protocolos definidos, o que presenta grandes obstáculos para as zonas remotas e pobres do mundo.
A proba rápida Pf Ag está desenvolvida para resolver estes obstáculos.Detecta o antíxeno específico de Pf pHRP-II en mostras de sangue humano.Pode ser realizado por persoal sen formación ou mínimamente cualificado, sen equipamento de laboratorio.
PRINCIPIO
A proba rápida Pf Ag é un inmunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.Os compoñentes da tira de proba consisten en: 1) unha almofada conxugada de cor borgoña que contén anticorpos monoclonais anti-pHRP-II conxugado con ouro coloide (conxugados pHRP II-ouro), 2) unha tira de membrana de nitrocelulosa que contén unha banda de proba (Pf) e unha banda de control (banda C).A banda Pf está recuberta previamente con anticorpos policlonais anti-pHRP-II, e a banda C está recuberta previamente con IgG anti-rato de cabra.
Durante o ensaio, un volume adecuado da mostra de sangue é dispensado no pozo da mostra (S) do casete de proba, engádese un tampón de lise ao pozo do tampón (B).O tampón contén un deterxente que lisa os glóbulos vermellos e libera o antíxeno pHRPII, que migra por acción capilar a través da tira mantida no casete.O pHRP-II se está presente na mostra unirase aos conxugados pHRP II-ouro.Despois, o inmunocomplexo é capturado na membrana polos anticorpos policlonais antipHRP II revestidos previamente, formando unha banda de Pf de cor borgoña, que indica un resultado positivo da proba de Pf.
A ausencia da banda Pf suxire un resultado negativo.A proba contén un control interno (banda C) que debería mostrar unha banda de cor borgoña do inmunocomplexo de IgG anti-rato de cabra/IgG de rato (pHRP II-conxugados de ouro) independentemente do desenvolvemento da cor en calquera das bandas Pf.En caso contrario, o resultado da proba non é válido e a mostra debe ser probada de novo con outro dispositivo.
