RESUMO E EXPLICACIÓN DA PROBA
A leishmaniose visceral, ou Kala-azar, é unha infección diseminada causada por varias subespecies de L. donovani.A Organización Mundial da Saúde (OMS) estima que a enfermidade afecta a aproximadamente 12 millóns de persoas en 88 países.Transmítese aos humanos por mordeduras dos flebótomos Phlebotomus, que adquiren infección ao alimentarse de animais infectados.Aínda que é unha enfermidade que se atopa nos países pobres, no sur de Europa, converteuse na principal infección oportunista en pacientes con SIDA.A identificación do organismo L. donovani a partir do sangue, a medula ósea, o fígado, os ganglios linfáticos ou o bazo proporciona un medio definitivo de diagnóstico.Detección serolóxica de anti-L.A IgM donovani é un excelente marcador para a leishmaniose visceral aguda.As probas utilizadas na clínica inclúense ELISA, anticorpos fluorescentes ou probas de aglutinación directa 4-5.Recentemente, a utilización da proteína específica de L. donovani na proba mellorou drasticamente a sensibilidade e a especificidade.
A proba rápida combinada de Leishmania IgG/IgM é unha proba serolóxica baseada en proteínas recombinantes, que detecta simultaneamente anticorpos IgG e IgM contra L. Donovani.A proba proporciona un resultado fiable en 15 minutos sen ningún instrumento.
PRINCIPIO
A proba rápida de Leishmania IgG/IgM é un inmunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.O casete de proba consta de: 1) unha almofada conxugada de cor borgoña que contén antíxeno recombinante de L. donovani conxugado con ouro coloide (conxugados de Leishmania) e conxugados IgG-ouro de coello, 2) unha tira de membrana de nitrocelulosa que contén dúas bandas de proba (bandas T1 e T2) e unha banda de control (banda C).A banda T1 está recuberta previamente con IgM monoclonal anti-humana para a detección de anti-L.A banda donovani IgM, T2 está recuberta previamente con reactivos para a detección de anti-L.donovani IgG, e a banda C está recuberta previamente con IgG anti coello de cabra.
Cando se dispensa un volume adecuado de mostra de proba no pozo da mostra do casete, a mostra migra por acción capilar a través do casete.A IgM de L. donovani se está presente no exemplar unirase aos conxugados de Leishmania.Despois, o inmunocomplexo é capturado na membrana polo anticorpo anti-IgM humano pre-revestido, formando unha banda T1 de cor burdeos, o que indica un resultado positivo da proba de L. donovani IgM.A IgG de L. donovani se está presente no exemplar unirase aos conxugados de Leishmania.Despois, o inmunocomplexo é capturado polos reactivos previamente revestidos da membrana, formando unha banda T2 de cor borgoña, o que indica un resultado positivo da proba de IgG de L. donovani.
A ausencia de bandas T (T1 e T2) suxire un resultado negativo.A proba contén un control interno (banda C) que debería mostrar unha banda de cor borgoña do inmunocomplexo do conxugado IgG anti-coello de cabra/IgG de ouro de coello independentemente do desenvolvemento da cor en calquera das bandas T.En caso contrario, o resultado da proba non é válido e a mostra debe ser probada de novo con outro dispositivo.
