RESUMO E EXPLICACIÓN DA PROBA
A filariose linfática coñecida como elefantiasis, causada principalmente por W. bancrofti e B. malayi, afecta a uns 120 millóns de persoas en 80 países.A enfermidade transmítese aos humanos polas picaduras de mosquitos infectados dentro das cales as microflarias succionadas dun suxeito humano infectado se desenvolven en larvas de terceiro estadio.Xeralmente, é necesaria a exposición repetida e prolongada a larvas infectadas para o establecemento da infección humana.
O diagnóstico parasitolóxico definitivo é a demostración de microflarias en mostras de sangue.Non obstante, esta proba estándar de ouro está restrinxida pola esixencia de recollida de sangue nocturno e a falta de sensibilidade adecuada.A detección de antíxenos circulantes está dispoñible comercialmente.A súa utilidade é limitada para W. bancrofti.Ademais, a microfilaremia e a antixenemia desenvólvense desde meses ata anos despois da exposición.
A detección de anticorpos proporciona un medio precoz para detectar a infección por parasitos filarias.A presenza de IgM nos antíxenos do parasito suxire a infección actual, mentres que a IgG corresponde á fase tardía da infección ou á infección pasada.Ademais, a identificación de antíxenos conservados permite que a proba "pan-filaria" sexa aplicable.A utilización de proteínas recombinantes elimina as reaccións cruzadas con individuos que teñen outras enfermidades parasitarias.
A proba rápida combinada de filariose IgG/IgM usa recombinante conservada
antíxenos para detectar simultáneamente IgG e IgM para os parasitos de W. bancrofti e B. malayi sen restrición á recollida de mostras.
PRINCIPIO
O kit de proba rápida de filariose IgG/IgM é un inmunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.O casete de proba consta de: 1) unha almofada conxugada de cor borgoña que contén antíxenos comúns recombinantes de W. bancrofti e B. malayi conxugados con ouro coloide (conxugados de filariase) e conxugados IgG-ouro de coello, 2) unha tira de membrana de nitrocelulosa que contén dúas bandas de proba C (banda de control) (banda M e G).A banda M está recuberta previamente con IgM monoclonal anti-humana para a detección de IgM anti-W. bancrofti e B. malayi, a banda G está recuberta previamente con reactivos para a detección de IgG anti-W.bancrofti e B. malayi, e a banda C está previamente recuberta con IgG anti coello de cabra.
Cando se dispensa un volume adecuado de mostra de proba no pozo da mostra do casete, a mostra migra por acción capilar a través do casete.Os anticorpos IgM de W. bancrofti ou B. malayi se están presentes na mostra uniranse aos conxugados da filariose.Despois, o inmunocomplexo é capturado na membrana polo anticorpo anti-IgM humano prerevestido, formando unha banda M de cor borgoña, o que indica un resultado positivo da proba de IgM de W. bancrofti ou B. malayi.
Os anticorpos IgG de W. bancrofti ou B. malayi se están presentes no espécime uniranse aos conxugados da filariose.O inmunocomplexo é entón capturado polos reactivos previamente revestidos da membrana, formando unha banda G de cor borgoña, o que indica un resultado positivo da proba de IgG de W. bancrofti ou B. malayi.
A ausencia de bandas de proba (M e G) suxire un resultado negativo.A proba contén un control interno (banda C) que debería mostrar unha banda de cor borgoña do inmunocomplexo do conxugado IgG anti coello de cabra/IgG de ouro de coello independentemente do desenvolvemento da cor en calquera das bandas de proba.En caso contrario, o resultado da proba non é válido e a mostra debe ser probada de novo con outro dispositivo.